2021年8月《藥物設計、開發及療法》期刊發表了文章銀杏酮酯聯合阿司匹林協同抗血小板作用研究。

文章摘要

銀杏酮酯聯合阿司匹林協同抗血小板作用研究

目的: 通過體外模型研究銀杏酮酯(GBE50)與阿司匹林聯合應用的協同抗血小板作用。

方法: 以花生四烯酸(AA)、血小板活化因子(PAF)、二磷酸腺苷(ADP)和膠原蛋白為誘導物。利用兔血制備貧血小板血漿和富血小板血漿，檢測 GBE50 （0.01 mg/ml-3 mg/ml）、阿司匹林（0.01 mg/ml-3 mg/ml）及GBE50 與阿司匹林 1:1（0.01 mg/ml-3 mg/ml）聯用的抗血小板作用。采用 Synergy finder 分析 GBE50 與阿司匹林是否有協同抗血小板作用。通過UPLC-Q/TOF-MS分析鑒定 GBE50 中的化學成分，并通過 TCMSP 數據庫篩選活性化合物。銀杏酮酯活性成分和阿司匹林的靶點均在 TCMSP、CCGs、Swiss target prediction 及 DrugBank 等數據庫中獲得。涉及血小板聚集的相關靶點從GenCLiP數據庫中獲取。構建化合物-血小板聚集靶點網絡，進行GO和KEGG富集分析，以識別銀杏酮酯和阿司匹林聯合抗血小板作用關鍵的生物過程和信號通路。采用ELISA法檢測在體外模型中檢測銀杏酮酯和阿司匹林單獨應用及二者 1：1 聯合給藥后血栓素B2 (TXB2)、環磷酸腺苷(cAMP)和PAF受體(PAFR)水平，以確定 GBE50、阿司匹林及其聯合用藥對上述通路的影響。

藥物聯合協同圖。
注:AA (A)、PAF (B)、ADP (C)、膠原蛋白(D)誘導血小板聚集的聯合用藥相互作用分析。聯合用藥為0.01 mg/mL GBE50 + 0.01 mg/mL阿司匹林、0.03 mg/mL GBE50 + 0.03 mg/mL阿司匹林、0.1 mg/mL GBE50 + 0.1 mg/mL阿司匹林、0.3 mg/mL GBE50 + 0.3 mg/mL阿司匹林、1mg /mL GBE50 + 1mg /mL阿司匹林和3mg /mL GBE50 + 3mg /mL阿司匹林。結果為三個獨立實驗的均值±S.E.M.。在圖中，協同和拮抗劑量區域用紅色和綠色突出顯示。

結果: 與銀杏酮酯或阿司匹林單獨應用相比，二者 1：1 聯合應用對 AA、ADP、PAF 和膠原誘導的血小板聚集都有很強的抑制作用，聯合應用半抑制濃度（IC50）分別為：0.067 mg/ml、 1.474 mg/ml、0.2886 mg/ml 和 0.149 mg/ml。協同分析顯示，在 AA 誘導的血小板聚集中，銀杏酮酯聯合阿司匹林可發揮協同抗血小板作用，而在 ADP、PAF 和膠原誘導的血小板聚集中發揮相加抗血小板作用。經成分鑒定及活性篩選后，銀杏酮酯中有7個成分被認定為潛在的抗血小板活性成分。成分-靶點網絡圖及富集分析表明，銀杏酮酯主要通過 cAMP 通路、AA 代謝及鈣離子信號調節血小板聚集。阿司匹林主要通過 AA 代謝及血小板活化通路調節血小板聚集。ELISA 實驗表明銀杏酮酯聯合阿司匹林可以顯著增加血小板內 cAMP 水平，降低 TXB2 和 PAFR 的水平。
結論: GBE50 聯合阿司匹林可增強抗血小板作用。它們在抑制血小板聚集方面具有協同和加強作用。其機制可能與增加血小板 cAMP 水平，降低 TXB2 和 PAFR 水平有關。該研究闡述了銀杏酮酯（GBE50）作為治療血栓相關疾病的應用價值。
關鍵詞:銀杏葉，阿司匹林，抗血小板，協同作用，中草藥，花生四烯酸

全文為The Synergistic Effect of Ginkgo biloba Extract 50 and Aspirin Against Platelet Aggregation.Drug Design, Development and Therapy 2021:15 3543–3560.